Dados do Trabalho

Título

DETECÇÃO MOLECULAR DE ARBOVÍRUS URBANO EM URINA, PROVENIENTES DA VIGILÂNCIA LABORATORIAL DAS ARBOVIROSES

Introdução

A maioria dos arbovírus de importância em saúde pública pertence aos gêneros Flavivirus, Alphavirus ou Orthobunyavirus. O diagnóstico pode ser realizado através de testes sorológicos ou detecção molecular em vários tipos de amostras biológicas, porém um tempo de viremia variado, estes testes podem apresentar resultados falso-negativos ou podem ocorrer reações cruzadas de anticorpos com antígenos de vírus do mesmo grupo. A padronização da técnica RT-qPCR utilizando urina como amostra clínica será um potencial teste específico e sensível para detecção de arbovírus em amostra de infecção tardia, contribuindo para às ações de vigilâncias.

Objetivo(s)

O objetivo desse trabalho foi verificar se a urina pode ser utilizada como amostra preferencial na investigação epidemiológica a partir da amplitude do intervalo temporal entre o início dos sintomas e a possibilidade de detecção genômica em urina.

Material e Métodos

Para a extração de RNA foi realizada utilizando o kit QIAamp® viral RNA (Qiagen, Hilden, Germany). Já a RT-qPCR (PCR Quantitativo em Tempo Real) foi feita utilizado o kit SuperScript® III Platinum® One-Step qRT-PCR (ThermoFisher Scientific). Foram adicionados 20µL da mistura e reagentes (Água livre de nucleases, prime, sonda, mix de enzimas SIII/taqPI e o ROX) em cada poço e 5 µL do RNA extraído, obtendo assim um volume final de 25µL. Cada amostra e controles foram aplicados em duplicatas.

Resultados e Conclusão

Foram incluídos 85 pacientes com suspeita de Dengue, Zika, Febre do Nilo Ocidental e Encefalite Saint Louis. Do total de amostras analisadas, uma apresentou detecção dos vírus investigados, sendo a amostra positiva para o vírus Zika (ZIKV). Em relação ao tempo entre o início dos sintomas e coleta da urina analisado em dias, observou-se uma maior distribuição de amostras de urina coletadas entre 0 a 10 dias. Além disso, a amostra positiva para ZIKV foi detectada com coleta de 12 dias após o início dos sintomas. O uso de amostras alternativas como a urina no diagnóstico molecular de arboviroses, principalmente na fase aguda, vem sendo relatado em vários estudos. Sendo que estudos semelhantes a esse, de diagnóstico molecular, também apresentaram resultados significativos, os quais sugerem que o ZIKV pode ser detectado por mais tempo na urina na fase aguda e tardia da doença. O presente estudo mostrou um método diagnóstico alternativo para a confirmação de casos suspeitos de arbovírus.

Palavras-chave

Arboviroses. Diagnóstico. Urina.