Dados do Trabalho

Título

AVALIAÇÃO DE MARCADORES CROMOSSÔMICOS COM O ALVO PLASMIDIAL PARA A DETECÇÃO DE CHLAMYDIA TRACHOMATIS

Introdução

O tracoma é uma doença causada pela bactéria Chlamydia trachomatis, ocasionada por repetidas infecções pelos sorotipos A, B, Ba e C, sendo considerada uma das principais causas de cegueira no mundo. Ocorre durante a infância e se origina de uma infecção conjuntival severa que leva a alterações na pálpebra (entrópio) e inversão dos cílios (triquíase), cujo atrito ocasiona a opacificação corneana, diminuição da acuidade visual e cegueira. Utilizar testes sorológicos como Elisa e o LFA fornece uma maior janela de detecção para o tracoma, mas, apesar da sua facilidade de uso e baixo custo, a maioria dos testes sorológicos possui baixa sensibilidade, diferente dos testes moleculares que são mais rápidos e mais sensíveis, sendo o teste de PCR em tempo real (qPCR) o mais comum

Objetivo(s)

Avaliar a sensibilidade de detecção dos marcadores cromossômicos 23S e omcB, como marcadores moleculares complementares ao alvo plasmidial

Material e Métodos

Todos os resultados moleculares foram realizados em triplicatas técnicas, para a determinação do limite de detecção (LOD). Para a avaliação do limite de detecção dos alvos genômicos de Clamídia foram utilizadas 7 diluições, variando de 10.000 cópias genômicas na amostra sem diluição para, teoricamente, zero cópias genômicas na maior diluição de 1:1000000

Resultados e Conclusão

Os resultados mostram que o limite de detecção para cada um dos alvos cromossômicos verdadeiramente positivo até a diluição de 1:10000 com 10 cópias genômicas, entretanto houve amplificação de todas as triplicatas para o alvo do 23S e uma triplicata para o alvo omcB para a diluição 1:100000, com uma cópia genômica, porém apresentaram um CT maior que 37, não sendo considerados resultados confiáveis. De acordo com Ripa, 2007, na Suíça, o sequenciamento do DNA da região alvo plasmidial revelou uma deleção de 377 pb. Já Roberts, 2019, descobriu na Inglaterra uma mutação na região cromossômica. Corroborando com a utilização de dois alvos, o cromossômico e o plasmidial, para uma melhor detecção da bactéria evitando resultados falso-negativos provenientes de deleção ou ausência dos plasmídeos. Pode-se concluir que ao utilizar alvos os cromossômicos 23S ou omcB em conjunto com o alvo plasmidial para a detecção da bactéria, é uma estratégia plausível para aumentar a sensibilidade do teste, diminuindo a chance de resultados falso-negativos. Desses alvos cromossômicos o 23S é o mais provável a ser utilizado em conjunto com o alvo plasmidial por apresentar uma maior sensibilidade

Palavras-chave

Tracoma; qPCR; Chlamydia trachomatis

Área

Eixo 11 | Infecções causadas por bactérias