Dados do Trabalho

Título

Avaliação de proteínas recombinantes do nucleocapsídeo de três diferentes orthohantavírus em um imunoensaio de fluorescência baseado em microesferas magnéticas

Introdução

A síndrome pulmonar por hantavírus (SPH) é uma zoonose de alta letalidade, de difícil diagnóstico devido à sua semelhança clínica com outras doenças endêmicas no Brasil. Neste contexto, o desenvolvimento de ensaios alternativos, de alta acurácia para confirmação laboratorial de casos suspeitos de SPH é essencial para auxiliar as ações de saúde pública

Objetivo(s)

Avaliar a sensibilidade e especificidade de três nucleoproteínas recombinantes (NPr) dos orthohantavírus Andes (ANDV), Juquitiba (JUQV) e Seoul (SEOV) na detecção de anticorpos IgM e IgG a partir de um imunoensaio baseado em microesferas.

Material e Métodos

Este imunoensaio utiliza a fluorescência para detecção das interações antígeno-anticorpo, com alta sensibilidade, a partir de volume reduzido de amostras clínicas

Resultados e Conclusão

A detecção de IgM foi observada em 35/36 das amostras positivas utilizando NPr-ANDV e NPr-JUQV e em 30/36 utilizando NPr-SEOV. Entre as 124 amostras negativas avaliadas, 124, 121 e 119 apresentaram resultados negativos utilizando as proteínas NPr-ANDV, NPr-JUQV e NPr-SEOV, respectivamente. O teste apresentou sensibilidade de 97% (95%CI = 85.5–99.9%) para as NPr-ANDV e JUQV e 83% (95%CI=67.2–93.6%) para NPr-SEOV. A especificidade foi de 100% (95%CI = 97.1–100%) para NPr-ANDV, 98% (95%CI = 93.1–99.5%) para NPr-JUQV e 96% (95%CI = 90.8–98.7%) para NPr-SEOV. No teste de detecção de IgG, 34/36 foram positivas para NPr-ANDV, 35 para NPr-JUQV e 11 para NPr-SEOV. Entre as 124 amostras negativas avaliadas 123 foram negativas para NPr-ANDV e SEOV e 124 para NPr-JUQV. Estes resultados indicam sensibilidade de 94.4% (95%CI = 81.3–99.3%), 97.4% (95%CI = 86.2–99.9%) e 30.6% (95%CI = 16.4–48.1%) para as NPr-ANDV, JUQV e SEOV, respectivamente. A especificidade foi de 99.2% (95%CI = 95.6–99.9%) para NPR-ANDV e SEOV, e de 100% (95%CI = 97–100%) para NPr-JUQV. Os resultados demostraram uma alta eficiência dos antígenos selecionados para detecção de anticorpos em casos de SPH, confirmando o potencial do imunoensaio baseado em microesferas magnéticas na seleção de NPr para uso em diagnóstico. Cabe ressaltar que a menor sensibilidade e especificidade observada para o antígeno NPr-SEOV se deve ao fato deste agente estar associado a síndrome renal hemorrágica por hantavírus, endêmica na Eurásia, demostrando que apesar da maior variação antigênica em relação ao JUQV e ANDV, os dados reforçam a presença de reatividade cruzada entre os diferentes orthohantavírus.

Palavras-chave

Síndrome Pulmonar por Hantavírus, Diagnóstico, Microesfera magnética, Fluorescência