Dados do Trabalho

Título

Produção e padronização de protótipo de Ensaio Imunoenzimático-ELISA para o diagnóstico da leishmaniose tegumentar americana com antígeno solúvel de L.(V.)braziliensis

Introdução

O Ensaio Imunoenzimático-ELISA constitui método diagnóstico sorológico de fácil execução, baixo custo e muito utilizado na rotina diagnóstica de diversos agravos. No entanto, não existe na Rede Pública de Saúde, até o momento, um método sorológico eficaz, em relação aos aspectos de acessibilidade, custo e desempenho, para o diagnóstico da leishmaniose tegumentar americana-LTA capaz de substituir as técnicas parasitológicas e moleculares utilizadas atualmente.

Objetivo(s)

Padronizar, registrar e produzir um protótipo de kit para o diagnóstico sorológico da leishmaniose tegumentar americana, pelo método de ELISA.

Material e Métodos

O antígeno bruto foi produzido a partir de formas promastigotas de L.(V.) braziliensis de acordo com protocolo padronizado no LaPClinVigiLeish. Em seguida, os antígenos produzidos foram encaminhados para Bio-Manguinhos/LATED onde os mesmos passaram por avaliação, adaptação à plataforma de produção, adequação aos insumos e soluções e posteriormente avaliação de desempenho com um painel de amostras caracterizado. Para avaliação do protótipo foram utilizadas até o momento 58 amostras de pacientes confirmados para LTA por algum método parasitológico (exame direto, cultura) ou histopatológico e 103 pacientes sabidamente negativos de doadores de banco de sangue. O cut off foi estabelecido através de curva ROC e os resultados preliminares demonstraram uma sensibilidade de 93,10% (95%IC 0,83-0,98) e especificidade de 94,44% (95%IC 0,88-0,97). O trabalho ainda está em andamento e as próximas etapas serão uma testagem com “n” maior de amostras e validação com amostras clinicas para outras doenças.

Resultados e Conclusão

O ELISA se apresenta como uma boa opção diagnóstica para LTA, principalmente por ser de fácil descentralização e exigir coleta de amostra menos invasiva quando comparado com as técnicas vigentes. É sabido que a padronização de um teste sorológico para LTA é um desafio pois é uma doença que induz baixa produção de anticorpos nos pacientes acometidos. No entanto, nossos resultados são promissores e poderão contribuir para a produção futura de kits diagnósticos para LTA.

Palavras-chave

Leishmaniose tegumentar americana; diagnóstico; ELISA