Dados do Trabalho

Título

Sensores desoxirribozimas binários na detecção e identificação de micobactérias de importância clínica

Introdução

A detecção e identificação do Mycobacterium tuberculosis e de outras micobactérias de importância clínica é essencial para a introdução de esquemas terapêuticos eficazes e para o controle das infecções causadas. Neste sentido, o desenvolvimento de métodos diagnósticos rápidos e acurados torna-se necessário.

Objetivo(s)

Avaliar a especificidade de uma plataforma molecular, utilizando sensores desoxirribozimas binários (BiDz), para a detecção e identificação do Complexo M. tuberculosis (CMTB), Complexo M. abscessus (CMAB), M. avium, M. kansasii e M. intracellulare.

Material e Métodos

A partir do DNA de diferentes espécies de micobactérias, foi realizada a amplificação de uma região hipervariável 16S rRNA pela técnica de PCR. Posteriormente, os amplicons foram colocados em uma reação contendo os sensores BiDz e incubados por 30 minutos a 55°C no equipamento StepOneplus, para a leitura da fluorescência ao final da incubação. Os ensaios foram realizados em triplicata, sendo que cada espécie de micobactéria foi testada com um sensor específico para CMTB, CMAB, M. avium, M. kansasii e M. intracellulare.

Resultados e Conclusão

Quando utilizados os sensores BiDz frente às diferentes espécies de micobactérias, a especificidade dos sensores para CMTB e M. avium foi de 100%, e para CMAB, M. kansasii e M. intracellulare foi de 92,86%. A menor especificidade dos sensores BiDz para CMAB e M. intracellulare se deve a sua complementaridade com M. chelonae e M. chimaera, respectivamente. Isto é explicado pela relação filogeneticamente próxima das espécies, com similaridade de aproximadamente 100% das sequências do 16S rRNA. A menor especificidade dos sensores BiDz para M. kansasii pode ter ocorrido devido a complementaridade de um dos sensores com o M. tuberculosis. Estes dados indicam que esta plataforma molecular é uma promissora estratégia para a detecção e identificação do CMTB, CMAB, M. avium, M. kansasii e M. intracellulare. Embora os sensores BiDz para CMAB e M. intracellulare tenham também detectado M. chelonae e M. chimaera, é importante ressaltar que os esquemas terapêuticos preconizados para estas espécies relacionadas são os mesmos, podendo-se ampliar as espécies-alvos destes sensores sem prejuízo para o tratamento do paciente.

Palavras-chave

Mycobacterium; Plataforma diagnóstica; Desoxirribozimas; Especificidade.