Dados do Trabalho

Título

Variações técnicas do ensaio de liberação de interferon gama (IGRA), para diagnóstico de tuberculose latente, importantes para implantação da rede de laboratórios do Estado de São Paulo

Introdução

Uma das estratégias de combate à tuberculose (TB), doença que continua sendo grande desafio de saúde pública, é o diagnóstico de infecção latente (ILTB). Desta forma, o Ministério da Saúde incorporou o ensaio de liberação de interferon gama (IGRA) ao SUS em 2021 que, em adição a prova tuberculínica, pode aumentar o diagnóstico de ILTB e auxiliar na redução de casos de TB ativa. Neste sentido, uma rede de laboratórios está sendo implantada no Brasil, incluindo o Estado de São Paulo que identificou, a partir das redes de TB e CD4, laboratórios com infraestrutura para compor a rede de IGRA.

Objetivo(s)

Avaliar variações técnicas do ensaio de IGRA que podem afetar o resultado, utilizando o kit Quantiferon® TB Gold Plus (QTF®-Plus, Qiagen).

Material e Métodos

O total de 71 amostras de doadores voluntários do IIER e IAL foram avaliadas quanto ao mecanismo de homogeneização do sangue total nos tubos QTF-Plus®, tempo de coleta e temperatura de armazenamento dos plasmas após incubação do sangue em tubos QTF-Plus™, espectrofotômetro e filtros de referência utilizados na leitura das reações e refrigeração do sangue coletado antes do processamento.

Resultados e Conclusão

Com 23,9% de resultados positivos (17/71) e 0,03% (2/71) indeterminados, observou-se que o tempo de coleta e armazenamento dos plasmas após incubação nos tubos QTF-Plus®, espectrofotômetro (Microplate Reader MB-580, Heales X MultiScanFC, ThermoScientific) e filtro de referência (630 X 620 nm) utilizados na leitura das reações não interferem no resultado de IGRA. Resultados utilizando homogeneização manual (conforme fabricante) e mecânica (homogenizador de soluções AP32, Phoenix) dos tubos QTF-Plus® contendo sangue foram concordantes em 12/14 amostras avaliadas, sendo três positivos e nove negativos. Duas amostras apresentaram resultados discordantes, atribuída a possível faixa, que chamaremos de zona cinza, que deve ser definida para recomendar repetições e contribuir na elaboração de fluxograma de testagem. Refrigeração do sangue heparinizado até 48 horas antes do início do processamento não afetou os resultados, sugerindo ser possível armazenar amostras por até 48 horas a 2º-8ºC antes de serem processadas. Assim, concluímos que a homogeneização mecânica e refrigeração de sangue heparinizado permitem mais homogeneidade de ensaio entre diferentes executores e facilita o encaminhamento de amostras entre os laboratórios coletores e executores.

Palavras-chave

IGRA, tuberculose latente