Dados do Trabalho

Título

Evolução genômica do vírus Mayaro em diferentes tecidos de mosquitos e camundongos imunodeprimidos durante o ciclo de transmissão vetorial por Aedes aegypti e Culex quinquefasciatus

Introdução

Os vírus transmitidos por artrópodes (arbovírus) são mantidos na natureza por meio de ciclos entre vetores invertebrados hematófagos e hospedeiros vertebrados. Os arbovírus são responsáveis por causar surtos e epidemias em todo o mundo. A plasticidade dos vírus de RNA pode facilitar as mudanças de espécies de hospedeiros e vetores, o que pode levar a introdução de um vírus em determinada localidade e ao surgimento de epidemias. Surtos recentes, como por exemplo do vírus Mayaro (MAYV) nas regiões norte e centro-oeste do Brasil, e a continua notificação de vírus endêmicos como Dengue, demonstram a necessidade de entender melhor as pressões seletivas que influenciam na evolução dos arbovírus.

Objetivo(s)

Dessa forma, o objetivo desse trabalho foi analisar a evolução genômica de MAYV na infecção vetor-hospedeiro-vetor a partir de amostras de tecidos de mosquitos e camundongos imunodeprimidos coletadas ao longo de um ciclo de transmissão.

Material e Métodos

Mosquitos Aedes aegypti e Culex quinquefasciatus foram alimentados artificialmente com MAYV (1º ciclo). Após sete dias, esses mosquitos foram colocados para realizar o repasto sanguíneo em camundongos (CEUA IAM 166/2021) (2º ciclo). Após o aparecimento de sinais de infecção nos animais, novos mosquitos foram colocados para fazer o repasto sanguíneo nesses camundongos (3º ciclo). O RNA das amostras de Ae. aegypti (N=16), Cx. quinquefasciatus (N=1) e camundongos IFNAR BL/6 (-Ifnar1tm1.2Ees/J) (N=13) previamente positivos para MAYV por RT-qPCR em todos os ciclos, foram submetidos a uma transcrição reversa seguida de PCR multiplex com primers alvos para sequenciamento do genoma viral. O produto de PCR foi quantificado no Qubit HS DNA e a biblioteca preparada com o kit Illumina DNAPrep, sequenciada na plataforma MiSeq (Illumina), utilizando o Kit Miseq Reagent Micro 300 ciclos. Os genomas de MAYV foram então obtidos por meio da a ferramenta de análise ViralFlow baseada em referência e análises de variantes intrahospedeiro (ISNV).

Resultados e Conclusão

Como resultado, foram obtidos 30 genomas de MAYV com cobertura que variou de 52 a 97% e profundidade média de 274 a 1741 vezes. De todos os genomas analisados, foram encontradas variantes intrahost em 27 (90%) deles. Esse trabalho é inédito e pode auxiliar na compreensão da dinâmica da evolução das populações de arbovírus nos diferentes vetores e hospedeiro e como essas alterações podem favorecer a replicação e transmissão desses arbovírus na natureza.

Palavras-chave

Mayaro, genoma, Aedes aegypti, Culex quinquefasciatus, IFNAR BL/6.