Dados do Trabalho

Título

O transportador ABCC1-like está envolvido na detoxificação de mediadores do estresse e na resistência adquirida ao benznidazol em T. cruzi

Introdução

A doença de Chagas é uma antropozoonose causada pelo protozoário flagelado T. cruzi, que afeta oito milhões de pessoas no mundo. A diversidade genética e biológica das cepas de T. cruzi se reflete na resposta a quimioterapia, com cepas resistentes ao benznidazol, fármaco de primeira escolha. Os transportadores ABC utilizam a energia de hidrólise do ATP para realizar o efluxo de diversas moléculas através das membranas. Estas proteínas são encontradas em todos os reinos biológicos e encontram-se superexpressas em células que apresentam o fenótipo de resistência a múltiplas drogas.

Objetivo(s)

Sendo assim, nosso objetivo foi avaliar se os transportadores ABC poderiam participar da resposta detoxificadora contra estressores celulares ou quimioterápico.

Material e Métodos

Para isso, a atividade de efluxo mediada por transportadores ABC foi avaliada por citometria de fluxo em cepas naturalmente sensíveis e resistentes ao benznidazol. A intensidade de fluorescência de substratos foi mensurada na presença de inibidores do transporte ABC ou de agentes de depleção dos níveis de ATP ou tiol. A viabilidade dos parasitas foi avaliada por ensaio colorimétrico (MTT) ou por citometria de fluxo com iodeto de propídeo. A indução de resistência adquirida foi alcançada após exposição prolongada e crescente ao fármaco benznidazol por quatro meses.

Resultados e Conclusão

Os resultados demonstraram a ausência de um transporte ABCB1-like e a presença de um transporte ABCC1-like em T. cruzi, cujos substratos endógenos seriam glutationa e ceramidas. ABCC1-like parece transportar hemina, visto que essa porfirina pode atuar como um inibidor competitivo. Essas moléculas são conhecidas por participar de vias de sinalização ao estresse, sugerindo que este transporte pode estar envolvido na detoxificação celular de T. cruzi. Além disso, o efluxo ABCC1-like aumentou após o fenótipo de resistência adquirida ao benznidazol e a proteção se mostrou dependente de glutationa, indicando que este participa da extrusão de metabólitos de benznidazol. No entanto, o efluxo ABCC1-like não está envolvido na resistência natural ao benznidazol, uma vez que cepas naturalmente sensíveis apresentaram maior atividade transportadora do que as naturalmente resistentes. Diante desses resultados, podemos sugerir que o transportador ABCC1-like de T. cruzi, juntamente com a via de biossíntese de glutationa, atua protegendo o parasita de estresse celular e poderia ser um alvo terapêutico para melhora da eficácia do tratamento em cepas resistentes.

Palavras-chave

Proteínas ABC
MDR
GSH