Dados do Trabalho

Título

Caracterização de α-glicosidases de espécies de Anopheles spp. do Brasil, com ênfase na sua capacidade de interação à toxina binária do Lysinibacillus sphaericus

Introdução

Lysinibacillus sphaericus é um agente eficaz no controle biológico de mosquitos. A ação inseticida dessa bactéria é mediada pela interação de sua toxina binária (Bin) com receptores específicos presentes no microvilli intestinal das larvas de espécies de insetos suscetíveis a este biolarvicida. Este receptor foi caracterizado como uma α-glicosidase com ortólogos presentes em Culex quinquefasciatus (Cqm1), Anopheles gambiae (Agm3) e Aedes aegypti (Aam1), sendo que variações em sua sequência foram associadas a susceptibilidade ou resistência à toxina Bin. A investigação de proteínas ortólogas em outras espécies de mosquitos auxiliará na compreensão do modo de ação do L. sphaericus no controle de outros vetores.

Objetivo(s)

O trabalho teve como objetivo caracterizar α-glicosidases ortólogas ao receptor Cqm1 da toxina Bin em espécies de Anopheles spp. avaliando sua potencial interação com esta toxina.

Material e Métodos

Para isso, genes ortólogos foram amplificados por PCR, a partir dos DNAs extraídos de sete espécies de Anopheles spp do Brasil, coletados em uma região de surto de malária extra amazônica. Estes genes foram clonados, sequenciados e analisados in silico. A potencial interação das proteínas preditas com a toxina Bin foi avaliada por meio de docking molecular, destacando possíveis regiões de interação em comparação com α-glicosidases já descritas.

Resultados e Conclusão

Como resultados, obtivemos as sequências parciais dos genes, e de suas respectivas proteínas, nas espécies investigadas de Anopheles spp. Estas apresentaram alta identidade com Cqm1 (>70%) e com Agm3 (>80%). A região S129-A312, importante para ligação à toxina Bin na Cqm1, está parcialmente conservada nas diferentes proteínas. Os resultados de docking molecular mostraram variações no potencial de ligação in silico destas proteínas com a toxina Bin, considerando os valores de energia livre menores e mais próximos ao valor obtido por Cqm1 (<-240). Proteínas de An. aquasalis, An. braziliensis, An. albitarsis, An. minor, An. argyritarsis e An. sawyeri apresentaram menores energias livres de ligação quando comparadas a de An. triannulatus, evidenciando que, de acordo com os resultados in silico, as primeiras seis espécies citadas podem ter capacidade de interação com a toxina Bin e são potencialmente suscetíveis a ação do L. sphaericus. Estes resultados validam a investigação do uso deste larvicida no controle de importantes espécies de Anopheles do Brasil.

Palavras-chave

Toxina binária; Receptores celulares; Mosquitos vetores; Modo de ação;