Dados do Trabalho

Título

EXPRESSÃO DOS GENES RELACIONADOS AOS INFLAMASSOMAS NLRP3 E AIM2 NAS FORMAS ANERGICA (DIFUSA) E HIPERERGICA (MUCOSA) DA LEISHMANIOSE TEGUMENTAR AMERICANA

Introdução

A leishmaniose tegumentar americana (LTA) apresenta um amplo espectro de manifestações clínicas e imunopatológicas. No centro do espectro está a leishmaniose cutânea localizada (LCL), onde ocorre uma resposta imune equilibrada. No polo de hiporreatividade está a leishmaniose cutânea anérgica difusa (LCAD), causada por L. (L.) amazonensis. No polo de hiperreatividade está a leishmaniose cutâneo mucosa (LCM) causada por L. (V.) braziliensis.
Estudos recentes mostraram que a resposta imune inata pode mediar a ativação de inflamassomas, que são plataformas multiproteicas de receptores intracelulares que ativam a produção de caspase, IL-1β e IL-18 e a morte celular por piroptose.

Objetivo(s)

Embora estudos com LTA tenham demonstrado um papel significativo dos inflamassomas na patogênese da doença, este representa o primeiro trabalho da expressão gênica dos inflamassomas nas formas polares do espectro (LCAD e LCM)

Material e Métodos

Para entender melhor o status transcricional de vias e genes relacionados aos inflamassomas, foi realizado o sequenciamento de RNA em larga escala (RNAseq) com 10 biópsias de pele de pacientes da Amazônia brasileira com LCAD/La (n=5) e LCM/Lb (n =5). A expressão de mRNA de ambos os grupos foi comparada com 6 amostras de pele saudável (controle). A análise de enriquecimento das vias biológicas (bancos de dados GSEA e Reactome) foi filtrada por valores NES>1 ou <-1 e Pajustado<0,05. Para determinar genes diferencialmente expressos (DEG), a ferramenta edgeR foi usada com base em log2 fold-change>1 ou <-1, e Pajustado <0,05, revelando genes regulados positivamente ou negativamente.

Resultados e Conclusão

Nossos resultados mostraram que as vias “inflamassomas” e “domínio de ligação de nucleotídeos, vias de sinalização de receptores (NLR) contendo repetições ricas em leucina” foram reguladas positivamente tanto na LCAD (NES = 1,60, Pajustado ≤ 0,001; NES = 1,60 Pajustado ≤ 0,001), quanto na LCM (NES=1,58, Pajustado ≤0,05; NES=1,65, Pajustado≤ 0,001). A análise transcricional mostrou uma superexpressão do gene AIM2 em ambas as formas clínicas graves quando comparadas ao controle basal (LCAD log2FC=3,63; LCM log2FC=6,25). Em relação a NLRP3, a expressão gênica foi positiva e equivalente entre LCAD (log2FC=0,86) e LCM (log2FC=0,71). Em resumo, nossos resultados mostraram que a ativação do inflamassoma AIM2 e NLRP3 ocorre principalmente nas formas graves LCAD e LCM, indicando tanto um papel anti-inflamatório, quanto pró-inflamatório na LTA causada por L. (L.) amazonensis e L. (V.) braziliensis.

Palavras-chave

LEISHMANIOSE TEGUMENTAR AMERICANA; INFLAMASSOMAS, NLRP3; AIM2; TRANSCRIPTOMA