Dados do Trabalho

Título

Atividade larvicida da biomassa bacteriana de linhagens isoladas de Aedes aegypti para o controle deste vetor

Introdução

Bactérias isoladas de Aedes aegypti podem apresentar potencial antagônico para o próprio vetor. Em testes preliminares, o cultivo total de quatro linhagens bacterianas isoladas de larvas (L47 e L65) e pupas (P18 e P12) de A. aegypti mostraram potencial tóxico para as larvas desse mosquito.

Objetivo(s)

Avaliar o potencial larvicida da biomassa bacteriana destas linhagens para as larvas de A. aegypti.

Material e Métodos

As linhagens foram reativadas em Nutriente Ágar (NA), mantidas em 30ºC por 24 horas em uma estufa BOD. Após isso, uma colônia bacteriana foi colocada em tubos de ensaio contendo 2 ml do respectivo meio de cultivo, mantidos em 30°C, 180 rpm por 24 horas em uma estufa rotativa. Em seguida, 50 µl do cultivo foram adicionados em frascos erlenmeyers contendo 100 ml do respectivo meio de cultivo, mantido nas mesmas condições anteriores por 72 horas. Os cultivos bacterianos foram centrifugados a 4ºC em 5000g, durante 40 minutos e o pellet obtido foi liofilizado durante 48 horas. A biomassa bacteriana obtida foi pesada para verificar o rendimento e diluída em H2O destilada. Os bioensaios foram realizados em quintuplicata, utilizando copos descartáveis de 150 ml, contendo 120 ml de água destilada, 20 larvas de 3° estádio, 1 mg de ração e as concentrações (0,5; 0,4; 0,3, 0,2, 0,1 e 0,008 mg/ml). O controle negativo foi feito nas mesmas condições, mas sem a biomassa bacteriana, e no controle positivo utilizou-se a cepa padrão Vectobacter WG. As leituras de mortalidade larval foram feitas no intervalo de 24, 48 e 72h. As linhagens bacterianas foram sequenciadas pelo gene 16S rRNA para a identificação molecular.

Resultados e Conclusão

Considerando os resultados obtidos da atividade larvicida, as linhagens P18NA e L47NA mataram 100% as larvas de A. aegypti nas primeiras 24 horas, em todas as concentrações testadas. O mesmo resultado de toxicidade foi observado para a cepa padrão Bti. As linhagens L65NA e P12NA não apresentaram atividade larvicida em nenhuma das concentrações testadas até 72 horas de avaliação. Em relação à identificação molecular, as linhagens P18NA e L47NA ambas são pertencentes ao gênero Enterobacter, e as linhagens L65NA e P12NA são pertencentes ao gênero Bacillus. As linhagens tóxicas para A. aegypti mostraram que possuem mecanismos de patogenicidade em suas células bacterianas. Portanto, as novas linhagens bacterianas com patogenicidade para o A. aegypti podem ser candidatas para novas formulações bioinseticidas.

Palavras-chave

Controle biológico; Aedes aegypti; bactérias cultiváveis, bioprospecção