Dados do Trabalho

Título

Descoberta de novos análogos do peptídeo antimicrobiano B1CTcu5 com potencial atividade contra cepas sensíveis e multirresistentes de Mycobacterium tuberculosis

Introdução

O último relatório da Organização Mundial da Saúde sobre a tuberculose (TB) indica que é uma das doenças infecciosas que mais mortes causa após o SARS-CoV-2. O diagnóstico e o tratamento da tuberculose foram agravados pelas restrições de acesso e bloqueios em várias partes do mundo. Além disso, a taxa de recorrência vem crescendo em ritmo acelerado, sendo possível que em um futuro próximo a TB volte a ser a principal causa de morte no mundo causada por um único agente infeccioso. O peptídeo antimicrobiano (PAM) B1CTcu5 é um peptídeo amida isolado da secreção da pele do sapo indiano Clinotarsus curtipes de 21 aminoácidos, e foi relatado pela primeira vez em 2020, mostrando valores iniciais de concentração mínima inibitória (CIM) de 12.5 μg/mL contra Mycobacterium tuberculosis (MTB).

Objetivo (s)

O objetivo deste trabalho foi gerar uma biblioteca de análogos do B1CTcu5 e avaliar sua atividade contra MTB, bem sua caracterização, cito e genotoxicidade.

Material e Métodos

Para este fim, 34 análogos sintetizados pelo método de SPPS utilizando a estratégia Fmoc, foram inicialmente projetados substituindo Cys15 e Cys21 por Ala, Ser e/ou Lys, bem como uma varredura de serina no N-terminal, e o peptídeo original linear/cíclico. Os produtos foram analisados por cromatografia liquida/espectrometria de massas e purificados (>95%) por HPLC de fase reversa e a estrutura secundaria assim como os dobramentos dos peptídeos foram analisados por dicroísmo circular. A atividade contra MTB foi realizada utilizando a cepa H37Rv e aislados clinicos em caldo 7H9 suplementado na escala 1 McFarland por 7 dias e lido com resazurina após 24 h. Da mesma forma, PAMs foram testados em cepas de macrófagos murinos J774A.1 usando concentrações de 10^6 células aderidas 24 h antes da incubação. Testes de AMES foram realizados para determinar o potencial mutagênico com as cepas mutantes TA98, TA100, TA102 e TA97a de S. Typhimurium.

Resultados e Conclusão

Após da síntese as amostras obtidas e estudadas evidenciaram um dobramento e estrutura secundaria diferenciada ao análogo original, adicionalmente os resultados evidenciaram atividade anti-MTB variada (1 - 32 μg/mL), não foram citotóxicas, mutagênica e nem hemolíticas; sendo CRDK-s16, CRDK-s18G e CRBR-34 as mais promissoras. Estes resultados representam um grande avanço para direcionar a atividade contra MTB de peptídeos e um possível novo anti-micobacteriano no mercado.

Palavras-chave

Desenho de fármacos; Novos fármacos; Peptídeos antimicrobianos; Tuberculose.

Agradecimentos

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo