Dados do Trabalho

Título

Resistência a isoniazida em isolados clínicos de Mycobacterium tuberculosis monorresistentes a rifampicina pelo teste GenoType®MTBDRplus

Introdução

A Organização Mundial da Saúde (OMS) recomendou em 2016, o teste molecular Line Probe Assay GenoType®MTBDRplus (LPA-plus) para detecção rápida de resistência aos dois medicamentos mais eficazes para o tratamento da tuberculose, rifampicina (RIF) e isoniazida (INH). Estudo de revisão realizado pela OMS no mesmo ano estimou sensibilidade e especificidade agrupadas do LPA-plus para predição de resistência a INH a partir de cultura em 89,4% e 98,9% respectivamente.

Objetivo (s)

Estimar a frequência de resistência a INH entre os isolados de Mycobacterium tuberculosis (MTB) monorresistentes a RIF detectados pelo teste LPA-plus, recebidos pelo Laboratório de Referência do Estado de São Paulo para diagnóstico de resistência.

Material e Métodos

No período de janeiro de 2022 a fevereiro de 2023 os isolados de MTB recebidos pelo Instituto Adolfo Lutz para diagnóstico de resistência que apresentaram mutações no gene rpoB pelo LPA-plus foram submetidos ao teste de sensibilidade fenotípico (TS) a INH e RIF pelo método BACTEC MGIT 960. Os isolados de MTB fenotipicamente resistentes a INH foram submetidos ao sequenciamento do genoma total (SGT) utilizando a plataforma Illumina e as sequências FastQ, analisadas pela pipeline da plataforma online TB-Profiler.

Resultados e Conclusão

No período estudado, 104 isolados de MTB (um por pessoa) foram incluídos no estudo, 91 recebidos no ano de 2022 e 13 no ano de 2023. Dos 104 isolados testados pelo Bactec MGIT, 91 (87,5%) foram sensíveis a INH e RIF, 7 (6,7%) monorresistentes a RIF, 4 (3,8%) resistentes a INH e RIF e 2 (2,0%) resistentes somente a INH. A maioria (n=90, 86,5%) dos isolados sensíveis a INH e RIF apresentavam mutações inferidas no gene rpoB (LPA-plus), as quais conferem resistência limítrofe não detectada pelo TS fenotípico. Quatro dos seis isolados resistentes a INH foram submetidos ao SGT: três apresentaram mutações no gene katG não contempladas no teste LPA-plus (Gly121Asn, Gly121Val, Asn138Ser) e um apresentou mutação dupla no gene katG (Val1Leu e Ser315Thr), sendo que a mutação Ser315Thr está incluída no LPA-plus. O teste LPA-plus detectou corretamente 94,2% dos isolados testados como sensíveis a INH quando comparado ao método fenotípico.

Palavras-chave

Bactec MGIT, Genotype MTBDRplus, isoniazida, resistência a medicamentos.

Agradecimentos

Fundação de Amparo à pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP). PDIP - Programa de Modernização dos Institutos Estaduais de Pesquisa. Processos 2022/05493-4 e 2020/12585-7.