Dados do Trabalho

Título

Seletividade na terapia para leishmaniose cutânea e visceral: atividade do azul de metileno e derivados inéditos in silico e in vitro

Introdução

A terapia para as leishmanioses emprega antimoniais pentavalentes como escolha primária há mais de 6 décadas, responsáveis por alta toxicidade e de administração dolorosa, contribuintes para descontinuidade do tratamento e seleção de resistência. Portanto, a busca por fármacos efetivos e de uso oral é crucial.

Objetivo (s)

Desse modo, realizamos a predição in silico e a atividade in vitro do azul de metileno (AM) e seus derivados inéditos (NAM, NAM-B, NAM-P, sob sigilo patentário) para tratamento da leishmaniose cutânea e visceral.

Material e Métodos

O software SwissADME foi usado para predizer características físico-químicas e farmacocinéticas. In vitro, foram utilizados promastigotas de Leishmania amazonensis PH8, Leishmania infantum PP75 e macrófagos J774 não tratados ou tratados com diferentes concentrações dos compostos, serialmente diluídos em microplacas de 96 poços. A viabilidade celular, determinação da CI50, CC50 e índice de seletividade (IS), foi realizada pelo teste de Alamar blue.

Resultados e Conclusão

A análise in silico demonstrou que os compostos têm possibilidade de absorção gastrointestinal, não ultrapassam a barreira hematoencefálica e são substratos para glicoproteína-P. Com relação a inibição de CYPs, apenas NAM-B e NAM-P são preditos como inibidores de CYP3A4. As curvas de crescimento das espécies atingiram fase logarítmica tardia no 5º dia e parasitos dessa fase foram utilizados nos experimentos. Todos os compostos causaram inibição de forma dose-dependente. Para L. amazonensis as CI50 do AM, NAM, NAM-P e NAM-B foram 61,44, 5,42, 5,48, 2,84 μM, respectivamente. Enquanto para L. infantum, AM = 10,37 μM, NAM-B = 3,73 μM e NAM-P = 1,51 μM. As CC50 sobre os macrófagos foram de 23 a 140 vezes maior quando comparadas a CI50, a saber: AM = 241,50 μM, NAM = 194,20 μM, NAM-B =124,50 μM, NAM-P = 211,80 μM. Assim, foram obtidos os índices de seletividade para L. amazonensis (ISAM = 3,93 μM, ISNAM = 35,83 μM e ISNAM-B = 22,72; ISNAM-P = 74,58) e L. infantum (ISAM = 23,28 μM, ISNAM-B = 33,37 μM e ISNAM-P =140,26). Portanto, os dados apresentados são promissores ao alcançar CI50 ≤ 5,0 conforme cascatas de triagem para novas drogas e IS > 10, superior a fármacos de escolhas para as leishmanioses, como a miltefosine e glucantime. Ademais, a capacidade de absorção gastrointestinal predita é importante para candidatos a fármacos de via oral.

Palavras-chave

Leishmanioses; Quimioterapia; Fármacos reposicionados; Azul de metileno

Agradecimentos

CNPq, CAPES, PPSUS- FAPERJ, Inova/Fiocruz