Dados do Trabalho

Título

Efeito do tratamento com moléculas derivadas da Pirazinamida complexadas com antimônio em Leishmania braziliensis

Introdução

Protozoários do gênero Leishmania são os agentes etiológicos das leishmanioses. A espécie Leishmania braziliensis é a causadora da forma
mucosa, a forma tegumentar mais grave da doença. O tratamento de primeira linha são os antimoniais pentavalentes, considerados tóxicos. Estudos anteriores do nosso grupo mostraram que o tuberculostático Pirazinamida apresenta atividade em L. braziliensis.

Objetivo (s)

O objetivo deste trabalho foi avaliar in vitro o potencial de moléculas derivadas da pirazinamida complexadas com antimônio (RSb 01,02,03,05,06, 07) em promastigotas e amastigotas de L. braziliensis.

Material e Métodos

Promastigotas de L. braziliensis e macrófagos de linhagem RAW 264.7 foram tratados com as moléculas nas concentrações 0 a 100 µM (promastigotas) por 96 h e 0 – 400 µM (RAW 264.7) por 48h. A viabilidade foi avaliada pela redução do MTT. O resultado foi expresso como percentual de viabilidade e foram estimadas as concentrações inibitórias IC50 em promastigotas e a concentração citotóxica CC50 para RAW264,7. Para amastigotas intracelulares, macrófagos foram infectados com L. braziliensis na proporção 10:1, tratados com as moléculas de 0 - 25 µM por 48h. Após o tratamento os macrófagos foram corados com corante Panótico, contados no microscópio óptico e o resultado expresso como índice de infecção.

Resultados e Conclusão

As moléculas RSb 01, 02 e 05 foram as mais ativas em promastigotas, apresentando IC 50 de 5,5, 1,9 e 8,5µM, respectivamente. Em
macrófagos, as moléculas RSb 01, 05, 06 e 07 apresentaram menor toxicidade, com CC 50 de 42, 44, 96, 133µM, respectivamente. Ensaios preliminares em amastigotas intracelulares mostraram que as molécula RSb 01, 02 e 03 apresentaram uma redução no índice de infecção a partir de 25 – 6,5 e 12,5 µM. A dosagem de óxido nítrico produzido por macrófagos infectados e tratados com as moléculas à 20µM mostrou que não houve aumento na produção de NO. Esses dados mostram que as moléculas tem potencial para continuidade dos estudos pré-clínicos in vitro e in vivo.

Palavras-chave

Leishmania braziliensis; pirazinamida; tratamento

Agradecimentos

Faperj por financiar o projeto, ao CNPq pela concessão da bolsa de iniciação científica, ao Cetreina/UERJ pela bolsa de estágio interno. Agradeço a Prof. Josane Lessa por conceder as moléculas, a prof. Silvia Amaral pela orientação e as leishmanietes Rosiane e Juliana pelas ajudas nos experimentos e a todos do Laboratório de Imunofarmacologia Parasitária.