Dados do Trabalho

Título

Prospecção de inibidores da enzima C24-metiltransferase (ERG6) para o tratamento da leishmaniose

Introdução

Na busca para o desenvolvimento racional de novos fármacos para o tratamento das leishmanioses, a escolha de um alvo seletivo no parasito é essencial. Enquanto os mamíferos produzem colesterol, os tripanossomatídeos produzem esteróis com esqueleto ergostano, como o ergosterol. O passo divergente da via dos parasitas é a transferência de um grupamento metila para o carbono 24 de esteróis com estrutura colestano, formando uma ramificação no C24 não existente nos esteróis de mamíferos, catalisado pela enzima esterol esterol 24-C-metiltransferase (ERG6). Já foi descrito o potencial do 22,26-azasterol como um possível inibidor desta enzima, onde a exposição dos parasitas a essa substância levou ao esgotamento completo dos esteróis endógenos.

Objetivo (s)

Sendo assim, a proposta do presente trabalho é a avaliação de azasteróis com diferentes modificações em sua estrutura como inibidores da enzima ERG6 de Leishmania spp. Para esse objetivo, utilizamos cepas de Leishmania infantum e Leishmania amazonensis que superexpressam a ERG6 para realizar uma triagem de fármacos.

Material e Métodos

Os azasteróis avaliados foram sintetizados pelos nossos colaboradores. Finasterida e dutasterida foram adquiridos da Sigma-Aldrich e também tiveram sua atividade leishmanicida avaliada por pertencerem à classe dos azasteróis. A confirmação da expressão gênica aumentada em Leishmania foi confirmada por PCR quantitativo. Foram utilizadas as cepas de L. amazonensis e L. infantum selvagens e as cepas recombinantes Laerg6high e Lierg6high e os controles representados por transfectadas somente com o vetor de expressão pSP72αNEOα. Em promastigotas de L. amazonensis transfectadas, foi possível observar um aumento da expressão relativa de mRNA da ERG6 de aproximadamente 17 vezes em relação à cepa selvagem, enquanto na cepa Lierg6high observamos um aumento de aproximadamente 45 vezes. Então, promastigotas foram incubadas com as moléculas-teste em diferentes concentrações e com os fármacos dutasterida e finasterida por 72 horas e o crescimento dos parasitos foi avaliado com resazurina.

Resultados e Conclusão

Todos os derivados de azasteróis da série ND apresentaram atividade leishmanicida contra promastigotas de Leishmania spp. Ensaios adicionais serão realizados, como de atividade antiamastigota e de toxicidade dos azasteróis, além da avaliação do perfil lipídico dessas leishmanias a fim de comprovar a inibição da formação dos produtos finais da via e estudo de docking molecular.

Palavras-chave

Azasteróis; Leishmania; Tripanossomatídeos

Agradecimentos

CAPES e FAPERJ