Dados do Trabalho

Título

Identificação de metabólitos alterados em macrófagos estimulados por lipídios do Mycobacterium tuberculosis

Introdução

A tuberculose (TB) é uma doença crônica infectocontagiosa causada por Mycobacterium tuberculosis (Mtb). Cerca de 40% do peso seco da parede celular do Mtb é composta de lipídios, e grande parte do genoma bacteriano é dedicado a biossíntese e degradação dessas moléculas. O transporte e importação de lipídios através da parede celular do bacilo é realizado pela expressão do operon mce (mce1-4), sendo que a parede celular do Mtb do tipo selvagem (WT) varia em relação a mais de 400 espécies lipídicas em comparação com a cepa com interrupção do operon mce1 (∆mce1). Em um estudo recente, identificou-se que lipídios do Mtb, extraídos de ambas as cepas, apresentam capacidade distinta de ativar a resposta pró-inflamatória em macrófagos murinos e em células T humanas. Assim, por serem moléculas importantes para a virulência do bacilo e por serem capazes de estimular uma resposta imune celular, a resposta inflamatória do
hospedeiro aos extratos lipídicos do Mtb deve ser investigada.

Objetivo (s)

Identificar rotas e metabólitos alterados em macrófagos murinos estimulados pelos lipídios do Mtb WT e ∆mce1 mediante a aplicação da abordagem metabolômica.

Material e Métodos

Realizou-se a cultura de macrófagos RAW 264.7 estimulados ou não com extratos lipídicos de Mtb para obtenção de pellets celulares. Em seguida, realizou-se o “quenching” metabólico, com posterior extração dos metabólitos intracelulares e, por fim, análise metabolômica por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (GC-MS).

Resultados e Conclusão

Observou-se a identificação de metabólitos relacionados a síntese de ácidos graxos (perfil inflamatório) e lipólise regulada de triacilgliceróis para a formação de ácidos graxos, e acúmulo dos monoacilglicerois (perfil antinflamatório) nos macrófagos estimulados com os lipídios da cepa WT em comparação a ∆mce1, e controle não estimulado. Diante disso, o perfil metabólico encontrado nos macrófagos estimulados
pelos lipídios do Mtb pode estar relacionado tanto a polarização M2 quanto a polarização M1, levando a manutenção do equilíbrio entre os estados pró e anti-inflamatórios.

Palavras-chave

Tuberculose; Operon mce1; Lipídios, Metabolômica.

Agradecimentos

Equipe P0 - LASP
Programa Pesquisa para o SUS (PPSUS), Programa de Expansão da Educação Profissional (PROEP) e Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq).