Dados do Trabalho

Título

Possível Participação de miRNAs na Patogenia da Leishmaniose Cutânea

Introdução

A Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) é uma doença endêmica na América Latina sendo causada principalmente no Brasil pela Leishmania (V.) braziliensis. As manifestações clínicas variam desde formas cutâneas (LC) leves e localizadas até formas mucosas (LM), e a resposta imune do hospedeiro determina fortemente o desfecho da infecção e o desenvolvimento da lesão. No entanto, os mecanismos que levam à progressão ou cicatrização das lesões e formação de úlceras ainda não são bem conhecidos e os microRNAs (miRNAs) podem estar envolvidos na patogênese da LC.

Objetivo (s)

Considerando a pouca compreensão do mecanismo que causa a formação da úlcera e a falta de evidências sobre o envolvimento de miRNAs na patogênese da LTA, onde a inflamação tem um papel importante, o objetivo do presente estudo foi avaliar a expressão de miRNA na LTA.

Material e Métodos

Pesquisamos no plasma de pacientes infectados por L. (V.) braziliensis com lesão cutânea ativa, autocurados, curados sem nenhum tratamento específico e controles saudáveis, e em paralelo, a expressão de miRNA em células THP-1 monocíticas humanas infectadas in vitro com promastigota de L. (V.) braziliensis. Para realizar o presente estudo, os cDNAs foram sintetizados com o Kit miScript II RT Kit (Qiagen) a partir de RNA total tanto de experimentos in vitro quanto de plasma de pacientes. Em seguida, foram submetidos ao qPCR array para análise da expressão de 84 microRNAs associados à resposta autoimune e inflamatória utilizando o kit miScript microRNA PCR array (QIAGEN). Utilizamos a plataforma Diana MiRPath 3.0 para prever interações miRNA/mRNA.

Resultados e Conclusão

Identificamos 14 miRNAs diferencialmente expressos em indivíduos autocurados, sendo oito regulados positivamente e seis regulados negativamente em relação ao controle. Ao comparar pacientes autocurados com o grupo de doença ativa, encontramos 23 miRNAs significativamente diferentes, 14 destes com regulação positiva e 9 com regulação negativa. Considerando todos os miRNAs diferencialmente expressos, buscamos genes alvo e vias metabólicas usando a plataforma Diana MiRPath 3.0 para prever interações miRNA/mRNA. Dois desses miRNAs (hsa-miR-15b-5p, hsa-miR-29b-3p) foram relacionados à via de junção aderente com 28 possíveis genes-alvo. Nossos dados sugerem o envolvimento de miRNAs no desenvolvimento da lesão em pacientes com LTA provavelmente modulando a tradução gênica relacionada à via de junção aderente.

Palavras-chave

células THP-1, L (V.) braziliensis, LTA, microRNA, patogênese

Agradecimentos

FAPESP, CNPq, CAPES,FAPESQ-PB,HC-FMUSP